Микробиологическая лаборатория

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ЛАБОРАТОРИИ И ИХ ОБОРУДОВАНИЕ

Все микробиологические, биохимические и моле-кулярно-биологические исследования микроорганизмов про­водят в специальных лабораториях, структура и оборудование которых зависят от объектов исследования (бактерий, вирусов, грибов, простейших), а также от их целевой направленности (научные исследования, диагностика заболеваний). Изучение иммунного ответа и серодиагностика заболеваний человека и животных осуществляют в иммунологических и серологичес­ких (serum — сыворотка крови) лабораториях.

Бактериологические, вирусологические, микологические и серологические (иммунологические) лаборатории входят в со­став санитарно-эпидемиологических станций (СЭС), диагнос­тических центров и крупных больниц. В лабораториях СЭС выполняют бактериологические, вирусологические и серологи­ческие анализы материалов, полученных от больных и контак­тировавших с ними лиц, обследуют бактерионосителей и про­водят санитарно-микробиологические исследования воды, воз­духа, почвы, пищевых продуктов и т.д.

В бактериологических и серологических лабораториях боль­ниц и диагностических центров проводят исследования с целью диагностики кишечных, гнойных, респираторных и дру­гих инфекционных заболеваний, осуществляют микробиологи­ческий контроль за стерилизацией и дезинфекцией.

Диагностику особо опасных инфекций (чума, туляремия, сибирская язва и др.) проводят в специальных режимных ла­бораториях, организация и порядок деятельности которых строго регламентированы.

В вирусологических лабораториях диагностируют заболева­ния, вызванные вирусами (грипп, гепатит, полиомиелит и др.), некоторыми бактериями — хламидиями (орнитоз и др.) и риккетсиями (сыпной тиф, Ку-лихорадка и др.). При организации и оборудовании вирусологических лабораторий учитывают спе­цифику работы с вирусами, культурами клеток и куриными эмбрионами, требующую строжайшей асептики.

В микологических лабораториях проводят диагностику за­болеваний, вызываемых патогенными грибами, возбудителями микозов.

Лаборатории обычно размещаются в нескольких помещени­ях, площадь которых определяется объемом работ и целевым назначением.

В каждой лаборатории предусмотрены:

а) боксы для работы с отдельными группами возбудителей;

б) помещения для серологических исследований;

в) помещения для мойки и стерилизации посуды, приготов­
ления питательных сред;

г) виварий с боксами для здоровых и подопытных живот­
ных;

д) регистратура для приема и выдачи анализов.

Наряду с этими помещениями в вирусологических лабора­ториях имеются боксы для специальной обработки исследуе­мого материала и работы с культурами клеток.

Оборудование микробиологических лабораторий

Лаборатории снабжены рядом обязательных приборов и аппаратов.

1. Приборы для микроскопии: биологический иммерсион­ный микроскоп с дополнительными приспособлениями (ос­ветитель, фазово-контрастное устройство, темнопольный кон­денсор и др.), люминесцентный микроскоп.

2. Термостаты и холодильники.

3. Приборы для приготовления питательных сред, растворов и т.д. аппарат для получения дистиллированной воды (дистил­лятор), технические и аналитические весы, рН-метры, аппара­тура для фильтрования, водяные бани, центрифуги.

4. Набор инструментов для манипуляций с микробами: бак­териологические петли, шпатели, иглы, пинцеты и др.

5. Лабораторная посуда: пробирки, колбы, чашки Петри, матрацы, флаконы, ампулы, пастеровские и градуированные пипетки и др. аппарат для изготовления ватно-марлевых про­бок.

Крупные диагностические комплексы имеют автоматичес­кие анализаторы и компьютеризированную систему оценки полученной информации.

В лаборатории выделено место для окраски микроскопичес­ких препаратов, где находятся растворы специальных красите­лей, спирт, кислоты, фильтровальная бумага и др. Каждое рабочее место снабжено газовой горелкой или спиртовкой и емкостью с дезинфицирующим раствором. Для повседневной работы лаборатория должна располагать необходимыми пита­тельными средами, химическими реактивами, диагностически­ми препаратами и другими материалами.

В крупных лабораториях имеются термостатные комнаты для массового выращивания микроорганизмов, постановки се­рологических реакций. Для выращивания, хранения культур, стерилизации лабораторной посуды и других целей используют следующую аппаратуру.

1. Термостат. Аппарат, в котором поддерживается постоян­ная температура. Оптимальная температура для размножения большинства патогенных микроорганизмов 37 «С. Термостаты бывают воздушными и водяными.

2. Микроанаэростат. Аппарат для выращивания микроорга­низмов в анаэробных условиях.

3. С02 -инкубатор. Аппарат для создания постоянной тем­пературы и атмосферы определенного газового состава. Пред­назначен для культивирования микроорганизмов, требователь­ных к газовому составу атмосферы.

4. Холодильники. Используют в микробиологических лабора­ториях для хранения культур микроорганизмов, питательных сред, крови, вакцин, сывороток и прочих биологически актив­ных препаратов при температуре около 4 °С. Для хранения препаратов при температуре ниже О °С применяют низкотем­пературные холодильники, в которых поддерживается темпе­ратура —20 °С или —75 «С.

5. Центрифуги. Применяют для осаждения микроорганиз­мов, эритроцитов и других клеток, для разделения неоднород­ных жидкостей (эмульсии, суспензии). В лабораториях исполь­зуют центрифуги с различными режимами работы.

6. Сушилъно-стерилизационный шкаф (печь Пастера). Пред­назначен для суховоздушной стерилизации стеклянной лабо­раторной посуды и других жаростойких материалов.

7. Стерилизатор паровой (автоклав). Предназначен для сте­рилизации перегретым водяным паром (под давлением). В ми­кробиологических лабораториях используют автоклавы разных моделей (вертикальные, горизонтальные, стационарные, пере­носные).

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЕ, ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЕ, МИКОЛОГИЧЕСКИЕ, ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ЛАБОРАТОРИИ И ИХ ОБОРУДОВАНИЕ. УСТРОЙСТВО СОВРЕМЕННЫХ МИКРОСКОПОВ. МЕТОДЫ МИКРОСКОПИИ. МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ МОРФОЛОГИИ МИКРООРГАНИЗМОВ

1. Правила работы и организация микробиологических (бактериологических, вирусологических, микологи­ческих) лабораторий.

2. Основные приборы и оборудование микробиологичес­кой лаборатории.

3. Микроскопы и микроскопическая техника. Правила работы с иммерсионным микроскопом (объективами).

Демонстрация

1. Устройство и применение основных приборов и обо­рудования, используемого в микробиологических ла­бораториях: термостата, центрифуг, автоклава, су­шильного шкафа, инструментария и посуды.

2. Устройство биологического микроскопа. Различные ме­тоды микроскопии: темнопольная, фазово-контрастная, люминесцентная, электронная.

3. Препараты микробов (дрожжей и бактерий) при раз­личных методах микроскопии.

1. Микроскопировать и зарисовать препараты дрожже-подобных грибов рода Candida . используя различные виды микроскопии.

Методические указания

Правила работы в микробиологических лабораториях .

Работу в микробиологической лаборатории медицинского учреждения проводят с возбудителями инфекционных заболеваний — пато­генными микроорганизмами.

Поэтому для предохранения от заражения персонал обязан строго соблюдать правила внутрен­него распорядка:

1. Все сотрудники должны работать в медицинских халатах, шапочках и сменной обуви. Вход в лабораторию без халата категорически воспрещен. В необходимых слу­чаях работающие надевают на лицо маску из марли. Ра­бота с особо опасными микробами регламентируется спе­циальной инструкцией и проводится в режимных лабора­ториях.

2. В лаборатории запрещается курить и принимать пищу.

3. Рабочее место должно содержаться в образцовом порядке. Личные вещи сотрудников следует хранить в специально отведенном месте.

4. При случайном попадании инфицированного мате­риала на стол, пол и другие поверхности это место необ­ходимо тщательно обработать дезинфицирующим раство­ром.

5. Хранение, наблюдение за культурами микробов и их уничтожение должны производиться согласно специаль­ной инструкции. Культуры патогенных микробов реги­стрируют в специальном журнале.

6. По окончании работы руки следует тщательно вы­мыть, а при необходимости обработать дезинфицирующим раствором.

Микроскопы и методы микроскопии

Микробиологическая лаборатория

Рис. 1.1. Микроскопы.

а — общий вид микроскопа «Биолам»; б — микроскоп МБР-1: 1 — основание микроскопа; 2 — предметный столик; 3 — винты для перемещения предмет­ного столика; 4 — клеммы, прижимающие препарат; 5 — конденсор; 6 — кронштейн конденсора; 7 — винт, укрепляющий конденсор в гильзе; 8 — рукоятка перемещения конденсора; 9 — рукоятка ирисовой диафрагмы кон­денсора; 10 — зеркало; 11 — тубусодержатель; 12 — рукоятка макрометричес-кого винта; 13 — рукоятка микрометрического винта; 14 — револьвер объек­тивов; 15 — объективы; 16 — наклонный тубус; 17 — винт для крепления ту­буса; 18 — окуляр.

Для микробиологических исследований используют не­сколько типов микроскопов (биологический, люминесцентный, электронный) и специальные методы микроскопии (фа-зово-контрастный, темнопольный).

В микробиологической практике применяют микроскопы отечественных марок: МБР-1, МБИ-2, МБИ-3, МБИ-6, «Био­лам» Р-1 и др. (рис. 1.1). Они предназначены для изучения формы, структуры, размеров и других признаков различных микробов, величина которых не менее 0,2—0,3 мкм.

Иммерсионная микроскопия

Применяется для увеличения разрешающей способности метода световой микроскопии . Раз­решающая способность системы светооптической микроско­пии определяется длиной волны видимого света и числовой апертурой системы. Числовая апертура показывает величину угла максимального конуса света, попадающего в объектив, и зависит от оптических свойств (преломляющей способности) среды между объектом и линзой объектива. Погружение объ­ектива в среду (минеральное масло, вода), имеющую высокий коэффициент преломления, близкий к таковому стекла, пре­пятствует рассеянию света от объекта.

Микробиологическая лаборатория

Рис. 1.2. Ход лучей в иммерсионной системе, п — показатель преломления.

Микробиологическая лаборатория

Рис. 1.3. Ход лучей в темнопольных конденсорах, а — параболоид-конденсор; б — кардиоид-конденсор; 1 — объектив; 2 — иммерсионное масло; 3 — препарат; 4 — зеркальная поверхность; 5 — диа­фрагма.

Таким образом достигается увеличение числовой апертуры и соответственно разре­шающей способности. Для иммерсионной микроскопии при­меняют специальные иммерсионные объективы, снабженные меткой (МИ — масляная иммерсия, ВИ — водная иммерсия). Предельная разрешающая способность иммерсионного микро­скопа не превышает 0,2 мкм. Ход лучей в иммерсионной системе показан на рис. 1.2.

Общее увеличение микроскопа определяется произведением увеличения объектива на увеличение окуляра. Например, уве­личение микроскопа с иммерсионным объективом 90 и окуля­ром 10 составляет: 90 x 10 = 900.

Микроскопия в проходящем свете (светлопольная микроско­пия ) используется для изучения окрашенных объектов в фик­сированных препаратах.

Темнопольная микроскопия . Применяется для прижизненно­го изучения микробов в нативных неокрашенных препаратах. Микроскопия в темном поле зрения основана на явлении дифракции света при боковом освещении частиц, взвешенных в жидкости (эффект Тиндаля ). Эффект достигается с помощью параболоид- или кардиоид-конденсора, которые заменяют обычный конденсор в биологическом микроскопе (рис. 1.3). При этом способе освещения в объектив попадают только лучи, отраженные от поверхности объекта. В результате на темном фоне (неосвещенном поле зрения) видны ярко светя­щиеся частицы. Препарат в этом случае имеет вид, показанный на рис. 1.4, б (на вклейке).

Фазово-контрастная микроскопия . Предназначена для изуче­ния нативных препаратов. Фазово-контрастное приспособле­ние дает возможность увидеть в микроскоп прозрачные объек­ты. Свет проходит через различные биологические структуры с разной скоростью, которая зависит от оптической плотности объекта. В результате возникает изменение фазы световой волны, не воспринимаемое глазом. Фазовое устройство, вклю­чающее особые конденсор и объектив, обеспечивает преобра­зование изменений фазы световой волны в видимые изменения амплитуды. Таким образом достигается усиление различия в оптической плотности объектов. Они приобретают высокую контрастность, которая может быть позитивной или негатив­ной. Позитивным фазовым контрастом называют темное изо­бражение объекта в светлом поле зрения, негативным — свет­лое изображение объекта на темном фоне (см. рис. 1.4; на вклейке).

Для фазово-контрастной микроскопии используют обыч­ный микроскоп и дополнительное фазово-контрастное устрой­ство КФ-1 или КФ-4 (рис. 1.5), а также специальные освети­тели.

Люминесцентная (или флюоресцентная) микроскопия. Осно­вана на явлении фотолюминесценции.

Люминесценция — свечение веществ, возникающее под воздействием внешнего излучения: светового, ультрафиолето­вого, ионизирующего и др. Фотолюминесценция — люмине­сценция объекта под влиянием света. Если освещать люминес-цирующий объект синим светом, то он испускает лучи крас­ного, оранжевого, желтого или зеленого цвета. В результате возникает цветное изображение объекта.

Микробиологическая лаборатория

Рис. 1.5. Фазово-контрастное устройство, а — фазовые объективы; б — вспомогательный микроскоп; в — фазовый кон­денсор.

Длина волны излучаемого света (цвет люминесценции) зависит от физико-хими­ческой структуры люминесцирующего вещества.

Первичная люминесценция биологических объектов (собст­венная, или биолюминесценция) наблюдается без предвари­тельного окрашивания за счет наличия собственных люминес-цирующих веществ, вторичная (наведенная) — возникает в ре­зультате окрашивания препаратов специальными люминесци-рующими красителями — флюорохромами (акридиновый оран­жевый, ауромин, корифосфин и др.). Люминесцентная микро­скопия по сравнению с обычными методами обладает рядом преимуществ: возможностью исследовать живые микробы и обнаруживать их в исследуемом материале в небольших кон­центрациях вследствие высокой степени контрастности.

В лабораторной практике люминесцентную микроскопию широко применяют для выявления и изучения многих микро­бов.

Электронная микроскопия . Позволяет наблюдать объекты, размеры которых лежат за пределами разрешающей способнос­ти светового микроскопа (0,2 мкм). Электронный микроскоп применяют для изучения вирусов, тонкого строения различных микроорганизмов, макромолекулярных структур и других суб­микроскопических объектов. Световые лучи в таких микроско­пах заменяет поток электронов, имеющий при определенных ускорениях длину волны около 0,005 нм, т.е. почти в 100 000 раз меньше длины волны видимого света. Высокая разре­шающая способность электронного микроскопа, достигаю­щая 0,1-0,2 нм, позволяет получить общее полезное увеличе­ние до 1 000 000.

Наряду с приборами «просвечивающего» типа используют сканирующие электронные микроскопы, обеспечивающие рель­ефное изображение поверхности объекта. Разрешающая спо­собность этих приборов значительно ниже, чем у электронных микроскопов «просвечивающего» типа.

Правила работы с микроскопом

Работа с любым световым микроскопом включает установку правильного освещения по­ля зрения и препарата и его микроскопию различными объек­тивами. Освещение может быть естественным (дневным) или искусственным, для чего используют специальные источники света — осветители разных марок.

При микроскопии препаратов с иммерсионным объективом следует строго придерживаться определенного порядка:

1) на приготовленный на предметном стекле и окрашенный мазок нанести каплю иммерсионного масла и поместить его на предметный столик, укрепив зажимами;

2) повернуть револьвер до отметки иммерсионного объек­тива 90х или 10Ох;

3) осторожно опустить тубус микроскопа до погружения объектива в каплю масла;

4) установить ориентировочный фокус при помощи макрометрического винта;

5) провести окончательную фокусировку препарата микро­ метрическим винтом, вращая его в пределах только одного оборота. Нельзя допускать соприкосновения объектива с пре­
паратом, так как это может повлечь поломку покровного стек­ла или фронтальной линзы объектива (свободное расстояние иммерсионного объектива 0,1—1 мм).

По окончании работы микроскопа необходимо удалить мас­ло с иммерсионного объектива и перевести револьвер на малый объектив 8х.

Для темнопольной и фазово-контрастной микроскопии ис­пользуют нативные препараты («раздавленная» капля и др. см. тему 2.1); микроскопируют с объективом 40х или специальным иммерсионным объективом с ирис-диафрагмой, позволяющей регулировать численную апертуру от 1,25 до 0,85. Толщина предметных стекол не должна превышать 1 — 1,5 мм, покров­ных — 0,15—0,2 мм.

№1 Медицинская микробиология, ее задачи, методы, разделы.

Микробиология – наука, предметом изучения которой являются микроскопические существа, называемые микроорганизмами, их биологические признаки, систематика, экология, взаимоотношения с другими организмами.

ЗАДАЧИ медицинской микробиологии:

установление этиологической (причинной) роли микроорганизмов в норме и патологии.

разработка методов диагностики, специфической профилактики и лечения инфекционных заболеваний, индикации (выявления) и индефикации (определения) возбудителей.

бактериологический и вирусологический контроль окружающей среды, продуктов питания, соблюдения режима стерилизации и надзор за источниками инфекции в лечебных и детских учреждениях.

контроль за чувствительностью микроорганизмов к антибиотикам и другим лечебным препаратам, состоянием микробиоценозов (микрофлорой) поверхностей и полостей тела человека. (1.изучение микроорганизмов; 2.патогенез действия микроорганизмов; 3.происхождение микроорганизмов)

Основные МЕТОДЫ микробиологии:

микроскопический (фазово-контрастная, темнопольная, люминисцентная, электронная, окраска по Романовскому-Гимзе) — с использованием приборов для микроскопии. Определяет форму, размеры, взаиморасположение микроорганизмов, их структуру, способность окрашиваться определенными красителями.

микробиологический (бактериологический, микологический, вирусологический) — выделение чистой культуры и ее идентификация.

биологический — заражение лабораторных животных с воспроизведением инфекционного процесса на чувствительных моделях (биопроба).

молекулярно-биологический ( ПЦР, ЛЦР, саузернблоттинг и нозенблоттинг, ДНК-ДНК-гибридизация, риботипирование, рестрикционный анализ).

№2 Основные этапы развития микробиологии. Работы Л.Пастера и Р.Коха и их значение для развития микробиологии.

Историю развития микробиологии можно разделить на 4 этапов морфологический, физиологический, иммунологический и молекулярно-генетический.

Открытие мира микроорганизмов связано с именем Антония Левенгука (1632-1723). А. Левенгук создал свой микроскоп, дающий увеличение до 300 раз, что позволило ему обнаружить, описать и зарисовать основные формы бактерий и клеток. Этот период назван – морфологическим. так как исследования в области микробиологии сводились к описанию форм бактерий.

Пастер сделал ряд выдающихся открытий. За короткий период с 1857 по 1885 г. он

Второй период развития микробиологии физиологический связан с именами ученых Луи Пастера (1822-1895) и Роберта Коха (1843-1910). Л. Пастер -установил, что молочнокислое и маслянокислое брожение, процесс разложения белковых продуктов есть результат жизнедеятельности микроорганизмов. -Он доказал, что микроорганизмы являются возбудителями ряда заболеваний, -разработал методы профилактики инфекционных заболеваний путем вакцинации, которые успешно используются до настоящего времени. Л. Пастер разработал не только принципы вакцинации, но и способ приготовления вакцин.

Роберт Кох. Физиологический период в развитии микробиологии связан также с именем немецкого ученого Роберта Коха, которому принадлежит разработка методов получения чистых культур бактерий, окраски бактерий при микроскопии, микрофотографии

Он разработал и, в дальнейшем, сформулировал триаду Коха:

предполагаемый микроорганизм — возбудитель данного заболевания не может быть выделен при других инфекционных заболеваниях;

микроорганизм должен быть выделен в чистой культуре;

чистая культура возбудителя должна вызывать у экспериментальных животных специфическую болезнь.

Благодаря методам, предложенным Р. Кохом, были изучены обмен веществ, дыхание, ферментативная активность, рост и размножение, культивирование на искусственных питательных средах, экзотоксины бактерий.

Третий период микробиологии ознаменовался созданием нового направления в микробиологии — иммунологией. Русский ученый И.И. Мечников (1845-1916) и немецкий ученый П. Эрлих (1854-1915) считаются основоположниками иммунологии. И.И. Мечников разработал фагоцитарную теорию иммунитета и впервые ввел понятие «Клеточный иммунитет». И.И. Мечников рассматривал фагоцитоз, как основной фактор защиты организма человека от возбудителей инфекционных заболеваний.

Молекулярно-генетический этап развития микробиологии начинается с 40-50 годов ХХ века. Огромные успехи в области молекулярной биологии, генетики, биотехнологии, биохимии позволили расшифровать геном бактерий и вирусов, создать рекомбинантные штаммы микроорганизмов и использовать их для получения разнообразных биологически активных веществ (антибиотиков, гормонов, ферментов, витаминов)

№3 История кафедры микробиологии Сибирского медицинского Университета.

В 1919 году на базе бактериологического института была открыта первая в Сибири кафедра микробиологии, которую возглавил директор института профессор П.В. Бутягин. Приоритетным направлением в деятельности кафедры явилась подготовка врачей —бактериологов для нужд здравоохранения. Научные исследования этого периода касались вопросов общей микробиологии, эпидемиологии, изучения специфического лечения и профилактики инфекционных заболеваний.

П. В. Бутягин создал первую школу микробиологов в Сибири.

После отъезда П.В. Бутягина в Новосибирск в 1931г. где он стал заведовать кафедрой микробиологии в Новосибирском медицинском институте, руководство кафедрой принял профессор И.Е. Ломакин. В этот период сотрудники кафедры изучали вопросы лабораторной диагностики брюшного тифа, серотерапии бешенства, фаготерапии и фагопрофилактики инфекционных заболеваний.

В 1937 году заведующим кафедрой был назначенС.П. Карпов, который работал в этой должности в течение 40 лет. В эти годы на кафедре был создан музей живых культур, разработаны учебные пособия, организован студенческий научный кружок

С 1976 по 1986 г. кафедрой микробиологии заведовал академикН.В. Васильев.

В 1986 году — руководство кафедрой перешло к профессору Ю.В. Федорову.

В 1998 году заведующим кафедрой микробиологии избран профессор Е.П. Красноженов.

В это время развернуты серии научных работ по определению участия тучных клеток в процессах инфекции и иммунитета, состоянию колонизационной резистентности слизистых оболочек и кожи при различных патологических процессах.

№4 Микробиологическая лаборатория и правила работы в ней.

лаборатории подразделяются на 3 категории:

1) базовые (общего типа); 2) режимные; 3) лаборатории особого режима.

Принципы организации и оборудования микробиологической лаборатории, правила работы в ней

Микробиологическая лаборатория в зависимости от ее профиля выполняет бактериологические, вирусологические и иммунологические исследования. В соответствии с назначением, лаборатория должна быть оснащена соответствующей аппаратурой и помещением. Лаборатория должна располагаться в отдельном здании или изолированной его части, оборудована водопроводом, канализацией, отоплением, горячим водоснабжением и иметь отдельный вход. Микробиологическая лаборатория общего назначения должна иметь следующие комнаты.

Бактериологическую с боксами

Подсобные помещения (душ, склад, гардероб, туалет)

Лабораторная комната должна быть светлой, просторной, стены окрашены масляной краской или облицованы керамической плиткой. В лабораторной комнате необходима холодная и горячая вода, раковина, дезинфицирующий раствор для мытья и обработки рук, аптечка для оказания первой медицинской помощи. В комнате должен находится холодильник, термостат, центрифуги, микроскопы, лабораторная мебель, рабочие столы, емкость для сбора инфицированной посуды и материала.

Бактериологическая комната с боксами. Для работы в стерильных условиях в бактериологической комнате должны быть оборудованы боксы с предбоксниками, с системой приточно-вытяжной вентиляции и бактерицидными лампами. В боксе должен находится стол с необходимыми принадлежностями для проведения стерильных посевов (горелка, стерильные пипетки, пробирки, чашки Петри и пробирки с питательной средой, бактериологическая петля и др.). Поверхность рабочего стола должна быть водонепроницаема, устойчива к дезинфектантам, кислотам, щелочам, органическим растворителям и умеренному нагреванию. Стены, потолок и пол комнаты должны быть моющимися, непроницаемыми для жидкости, устойчивы к дезинфицирующим растворам. В настоящее время используют для проведения стерильных работ ламинированные боксы, где оборудована подача стерильного воздуха под давлением.

Автоклавная используется для стерилизации посуды, питательных сред, одежды, а также для обеззараживания лабораторных отходов. Автоклавная должна быть оснащена следующим оборудованием: автоклавы, печи Пастера, стерилизаторы различной емкости, шкафы для стерильной посуды. К работе на автоклавах допускаются лица прошедшие специальную подготовку.

Виварий предназначен для проведения исследований на животных. Необходимо иметь два помещения вивария – одно для содержания чистых животных и второе для лабораторных животных, с которыми проводятся исследования. Вход в виварий должен быть ограничен специально отобранным персоналом. Клетки, кормушки для животных должны быть изготовлены из материала устойчивого к дезинфицирующим растворам.

Моечная комната предназначена для мойки лабораторной посуды и должна быть оборудована холодным и горячим водоснабжением, раковиной, а также шкафами для хранения и складирования пипеток, колб, чашек Петри и другой посуды.

Средоварочная комната располагается рядом с моечной и стерилизационной комнатами и предназначена для приготовления и разлива питательных сред. Комната оборудуется газовой или электрической плитой, раковиной с подведенной холодной и горячей водой. В ней необходимо иметь дистиллятор, холодильник для хранения питательных сред и биологических компонентов, бокс для приготовления и разлива питательных сред и растворов в стерильных условиях, шкафы для хранения сухих питательных сред, лабораторной посуды и химических реактивов.

Правила работы и поведения

в бактериологической лаборатории общего назначения

В помещение лаборатории нельзя входить без специальной одежды – халата, шапочки, сменной обуви.

Запрещается в помещении прием и хранение пищи. Курение.

Нельзя использовать лабораторную спец. одежду за пределами лаборатории.

Зараженный материал подлежит уничтожению, инструменты и поверхность рабочего стола, дезинфицируют после окончания работ.

После работы с культурой, животными, перед уходом из лаборатории необходимо вымыть руки.

Штаммы микроорганизмов, заразный материал должны хранится в сейфе или холодильнике закрытыми и опечатанными.

Необходимо проводить обеззараживания предметов, одежды, стола, комнаты, в случае если разбился сосуд с инфицированным материалом или произошел неосторожный разлив заразного материала.

Сотрудники лаборатории подлежат обязательной вакцинации против тех инфекционных заболеваний, с возбудителями которых возможна работа в лаборатории.

В лаборатории должна быть инструкция по технике безопасности, которую персонал должен знать и строго выполнять. Необходимо обязательно немедленно сообщить руководителю лаборатории обо всех аварийных ситуациях, создающих угрозу биологической безопасности и проводить все мероприятия для предотвращения последствий.

Каждая бактериологическая лаборатория должна иметь лицензию на право работы с возбудителями.

№5 Техника приготовления бактериального мазка и простые методы его окраски.

Виноделие и виноградарство

Тема 3 « Требования к микробиологической лаборатории»

Студенты изучают и конспектируют рекомендуемую литературу по следующим вопросам:

1. Устройство микробиологической лаборатории

2. Посуда для микробиологических анализов

3. Специальные микробиологические приборы

Литература: №№ 1, 10, 11, 15, 16.

1. Устройство микробиологической лаборатории

Микробиологическая лаборатория, как правило, размещается в специально оборудованном помещении с изолированным входом. Комнаты должны быть просторные и светлые с естественным осве­щением не менее 110 лк. Стены в лаборатории должны быть гладки­ми, нижнюю часть их на высоту 170 см окрашивают светлой масля­ной или эмалевой краской, верхнюю часть и потолок белят известью или известковой краской, впитывающей влагу. Полы покрывают ли­нолеумом, пластиком или каким-либо другим легко моющимся мате­риалом, мебель окрашивают в светлые тона.

Основные помещения оборудуют столами лабораторного типа, шкафами и полками для хранения аппаратуры, посуды, реактивов. Столы должны иметь подводку электроэнергии и снабжены газовы­ми горелками, лампами дневного света. В лаборатории необходимо иметь водопровод и слив.

Стол для микроскопирования располагают перед окнами на се­верной стороне. В солнечные дни окна в помещении завешивают бе­лыми шторами для защиты от прямых солнечных лучей, от действия которых может выйти из строя микроскоп в связи с размягчением клея (канадского бальзама из пихтовой смолы), связывающего линзы в оптических системах, а также для защиты глаз от утомления при микроскопировании. Стол должен быть устойчивым, поэтому его лучше укреплять на кронштейнах. От окна микроскоп должен быть расположен на расстоянии около 1 м.

Кроме основного рабочего помещения лаборатория имеет бокс, стерилизационную, где размещены автоклавы и сушильные шкафы, термостаты или термостатированные комнаты для выращивания микроорганизмов, помещение для хранения культур, моечную, холо­дильную комнату и т. д.

Бокс представляет собой небольшую изолированную комнату, разделенную на две части перегородкой, и служит для работы с чистыми культурами микроорганизмов. Вход в основное рабочее помещение бокса осуществляется через тамбур с раздвижной дверью, что исключает рез­кое перемещение воздуха, и, следовательно, занесение извне посторонней микрофлоры. Оборудование бокса состоит из стола с легко моющейся поверхностью, стула, газовой горелки и бактерицидной лампы, укреплен­ной в специальном штативе или смонтированной на потолке бокса. Удоб­но иметь подсобный стол, на котором размещают необходимые во время работы предметы. Все оборудование бокса, его стены, пол и потолок пе­риодически моют и протирают дезинфицирующими растворами; перед работой бокс облучают в течение 40-60 мин ультрафиолетовыми лучами. Бокс может быть устроен и в основном рабочем помещении, но обязательно отделенным от остальной комнаты застекленными стенками и за­стекленным потолком.

При отсутствии бокса-комнаты широко используют настольные боксы разных конструкций; например, стеклянные настольные шкафы, рамы и дно которых сделаны из отполированного дерева. В сред­нем размеры шкафа составляют: ширина 62, высота 54 и глубина 50 см. Передняя стенка шкафа поднимается в пазах и может устанавли­ваться на разной высоте. Перед работой шкаф стерилизуют разбавлен­ным водой этиловым спиртом с объемной долей этилового спирта 70-75%. Во время работы шкаф открывают настолько, чтобы руки работа­ющего могли свободно двигаться.

В настоящее время используют герметически закрытые камеры, работа в которых осуществляется под отрицательным воздушным дав­лением с помощью прикрепленных к передней панели резиновых пер­чаток. В некоторых боксах («Ламинарах») чистота атмосферы рабоче­го пространства обеспечивается циркуляцией стерильного воздушного потока внутри камеры.

2.Посуда для микробиологических анализов

Для проведения работ по культивированию микроорганизмов, приготовлению питательных сред и для других целей пользуются по­судой, которая должна удовлетворять определенным требованиям и в первую очередь — не должна содержать посторонних веществ. Она должна быть тщательно вымыта и не должна выделять в среду ника­ких веществ, например щелочей, окислов железа, кислот и др.; лучше всего пользоваться стеклянной, эмалированной или алюминиевой по­судой.

Используют посуду из стекла, выдерживающего нагревание при высокой температуре; для изучения свойств микроорганизмов приме­няют стеклянные приборы, стекла для микроскопирования; для извле­чения микроорганизмов и пересевов — иглы и петли.

Посуда. В микробиологической практике чаще всего пользуются пробирками, чашками Петри и колбами разного вида.

В микробиологической практике чаще всего пользуются пробир­ками и чашками Петри.

Пробирки должны быть без ранта, из прозрачного стекла, разме­ром 18×2,0 см и 18×1,5 см. Чтобы предохранить содержимое пробирок от попадания из воздуха микробов и культуры от высыхания их закрывают ватными пробками.

Чашки Петри. Чашка Петри состоит из двух чашек разного диа­метра. В чашку с меньшим диаметром помещают питательную среду, чашка большего диаметра служит крышкой. Диаметр чашек Петри 8-10-15 см, высота 1,5-2,0 см.

Микробиологическая лаборатория

Организация и оборудование
микробиологической лаборатории

В результате многогранного разнообразия биологической роли микро- и макроорганизмов, а также разнообразия взаимоотношений между ними, нередко возникают непредвиденные, а порой и необъяснимые ситуации, способствующие изменению уже устоявшихся экологических параметров, биоценозов, экосистем, биоритмов, связей между объектами и субъектами живой и неживой природы.

Для того, чтобы познать все многообразие возможностей микроорганизмов, обитающих в окружающей нас природе или поселившихся в растительных и животных организмах (в том числе и в организме человека) и их специфической роли в той или иной экологической нише, необходимо очень скрупулезно их изучать.

Для этого необходимо наряду с другими исследованиями проводить лабораторные микробиологические исследования в специальных лабораториях с соблюдением всех правил работы в микробиологических лабораториях.

Любые лабораторные микробиологические исследования необходимо проводить, соблюдая все правила предосторожности помня о том, что любой изучаемый объект может таить в себе угрозу для здоровья человека, угрозу экологическому равновесию. Поэтому необходимо работать так, чтобы не навредить не только себе, но и не навредить изучаемому объекту – не обсеменить его какими – либо микробами из окружающей среды.

Исследования, которые проводят микробиологические лаборатории, определяются их назначением.

Клинико – диагностические лаборатории проводят микробиологическую диагностику инфекционных болезней. Лабораторные методы диагностики инфекционных болезней позволяют обнаружить, выделить и идентифицировать возбудителя, выявить иммунологические изменения у больного и на основании результатов лабораторных исследований составить рациональную схему терапии.

Лаборатории санитарно – эпидемиологического надзора выполняют бактериологические, вирусологические, микологические, серологические исследования материала от больного, носителей возбудителей инфекций и здоровых людей, работающих в системе здравоохранения, торговли, общественного питания, образования, сельского хозяйства и пр.

Микробиологические лаборатории исследуют микробную обсемененность объектов окружающей среды: воздуха, почвы, воды, продуктов питания и др.

Специальные лаборатории контролируют безвредность и эффективность вакцин и сывороток, лечебных и других биологических препаратов.

В структуру любой микробиологической лаборатории (бактериологической, риккетсиозной, вирусологической, протозойной, микозной и др.) входят:
1. Лабораторные комнаты и боксы для работы в асептических условиях.
2. Автоклавная – специально оборудованное помещение для стерилизации питательных сред, посуды, обеззараживания отработанного материала.
3. Моечная, оборудованная для мытья посуды.
4. Виварий – помещение, предназначенное для содержания лабораторных животных.

В соответствии с Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии и личной гигиены при работе в лабораториях, выполняющих бактериологические, вирусологические, риккетсиозные, паразитологические, микозные исследования, помещения лабораторий, в которых производится работа с микроорганизмами должны располагаться в отдельном здании или в изолированной части здания.

Лаборатория должна быть обеспечена водопроводом, канализацией, электричеством, боксами с приточно – вытяжной вентиляцией, центральным отоплением и горячим водоснабжением. В лаборатории должны быть раковины для мытья рук персонала и раковины для мытья инвентаря.

В лабораторной комнате должен быть оборудован рабочий стол, место для окраски препаратов и микроскопирования. В этой комнате должны быть шкаф, термостат, холодильники, центрифуга, микроскоп, раковина с подводкой горячей и холодной воды, горелки (газовые или спиртовые), светильники.

Рабочий стол должен быть покрыт металлическим листом и установлен у окна. На столе размещают горелку, банку с бактериологическими петлями, коробку с предметными стеклами, штативы с пробирками и пипетками, оснащенными грушами, штатив с красителями во флаконах, банка ватой, банка с дезинфицирующим раствором.

В термостате при проведении исследований должна поддерживаться температура 37 градусов, оптимальная для подавляющего большинства микроорганизмов.

В холодильниках отдельно должны храниться питательные среды, кровь, желчь, диагностические препараты, культуры.

Анаэростаты используются для создания безкислородной среды при культивировании облигатных анаэробов.

Центрифуга используется для осаждения плотных частиц.

Шкаф необходим для хранения в нем лабораторной посуды (колбы, чашки Петри, пробирки, пипетки и пр.), сухих питательных сред, реактивов и пр.

Около раковины должны находиться сосуд с дезинфицирующим раствором для обработки рук, аптечка с набором предметов для оказания первой медицинской помощи, на стене укреплено электрополотенце.

Ряд работ с культурами микроорганизмов: пересевы чистых культур, видовой и количественный учет микроорганизмов, выделение чистых культур, определение чувствительности микробов к различным препаратам и пр. должно осуществляться в боксе. Бокс представляет собой небольшое изолированное помещение, разделенной перегородкой на две части. Вход в основную, рабочую часть бокса осуществляется через тамбур с раздвижной дверью, что исключает резкое перемещение воздуха, в силу чего исключается занесение извне посторонней микрофлоры. Все оборудование бокса регулярно должно подвергаться очистке от микрофлоры с использованием дезинфицирующих средств.

Перед началом работы бокс должен быть облучен ультрафиолетовыми лучами в течение 30 – 40 минут. Перед входом в бокс для работы, в предбокснике необходимо сменить халат, обувь, шапочку, одеть маску.

Помещение для приготовления питательных сред должно находиться рядом с моечной и стерилизационной. В моечной комнате должна быть раковина с подводкой холодной и горячей воды, дистиллятор, плита (газовая или электрическая), шкаф или полки для хранения чистой посуды.

В моечной должны быть моющие средства, ерши, ветошь, место для сушки вымытой посуды.

В стерилизационной должны находиться приборы (автоклавы, сушильные шкафы, аппарат Коха и пр.) для стерилизации посуды, питательных сред и обеззараживания отработанного материала.

Все помещения должны иметь естественное и искусственное освещение, температура воздуха должна поддерживаться в пределах 18 – 21 грардуса. Помещения должны иметь легко открывающиеся форточки или фрамуги и вытяжные шкафы. Стены в лабораторных помещениях должны быть облицованы белой глазурованной плиткой или выкрашены масляной краской светлых тонов на высоту 1,5 метра. Полы в лабораторных помещениях покрываются линолеумом или гладкой плиткой. Лабораторная мебель должна быть окрашена эмалевой или масляной краской светлых тонов. Рабочая поверхность столов должна быть покрыта кислото-, щелочо и теплоустойчивым материалом. Наружные и внутренние поверхности мебели должны быть доступны для обработки их дезинфицирующими веществами.

Ширина основных проходов в помещениях к рабочим местам должна быть не менее 1,5 метра. Помещения лаборатории должны быть непроницаемы для грызунов.

Прием образцов при наличии заполненного заявления. протокола отбора проб и оплаты:
понедельник — четверг
с 9.00 до 16.30
пятница — с 9.00 до 16.00
суббота, воскресенье — выходной Правила самостоятельного отбора проб воды

Филиал ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии г. Москве» в САО г. Москвы предлагает сотрудничество медицинским центрам г. Москвы в области оформления личных медицинских книжек, гигиенического обучения и аттестации декретированных контингентов.
Контактный телефон:
+7 (499) 747-61-83, +7 (495) 452-49-07

Микробиологическая лаборатория

Микробиологическая лаборатория

Заведующий отделом: Темирлиева Роза Османовна
тел. (495) 452-22-74
Микробиологическая лаборатория

В составе лаборатории 3 отделения:

  • Отделение вирусологии
  • Отделение санитарной бактериологии
  • Отделение эпидемиологической бактериологии с группой паразитологии

Микробиологическая лаборатория использует в своей практике как классические методы исследований, так и современные ПЦР-исследования материала из объектов окружающей среды и биоматериала, метод иммуно ферментного анализа (ИФА)

В нашей лаборатории проводятся следующие микробиологические исследования :

  • на кишечные инфекции (на шигеллы, сальмонеллы), материал для исследования — ректальный мазок,
    забор проводит наш лаборант – цена с забором для декретированных лиц — 291 р.
    для диагностики или госпитализации — 695 р.
  • фекалии при пищевой токсикоинфекции на энтеробактерии и стафилококк – цена 680 р.
  • микрофлоры кишечника на дисбактериоз с постановкой чувствительности к бактериофагам,
    противогрибковым препаратам и антибиотикам – цена 1936 р.
  • на стафилококк (зев, нос) – цена с забором материала для диагностики и госпитализации 548 р.
    для декретированных лиц — 278 р.
  • фекалии на стафилококки – 377 р.
  • мочи на микрофлору – цена 1063 р.
  • мокроты на микрофлору – 944 р.
  • клинического материала (мазки из зева и носа, раневое отделяемое, отделяемое из глаз, ушей)
    на микрофлору — 1034 р.
  • грудного молока на микрофлору – 900 р. При выделении из клинического материала бактерий
    определяется их чувствительность к антибиотикам, оплачивается отдельно.
  • определение чувствительности культур к антибиотикам методом дисков – 363 р.
  • на дифтерию (зев, нос) – цена с забором 652 р.
  • на стрептококки (зев) – цена с забором 506 р.
  • на коклюш (зев) – цена с забором 372 р.
  • на менингококк (мазок из глотки) — цена с забором 747 р.
  • на грибы рода Кандида – цена с забором 284 р.
  • кровь на носительство сальмонелл (брюшной тиф) — цена без забора для декретированных лиц — 159 р.,
    для диагностики и госпитализации — 375 р.
  • кровь на иерсиниоз – цена 596 р.
  • кровь на бруцеллез – цена для диагностики и госпитализации 312 р. для декретированных лиц 148 р.
  • кровь на стерильность – 391 р.
  • кровь на коклюш и паракоклюш — 360 р.
  • кровь на шигеллы — 1125 р.
  • кровь на наличие АТ к дифтерии — 380 р.
  • кровь на гемокультуру – 399 р.

Примечание: забор материала (мазки из зева, носа, ректальные мазки) — 96 р.
забор крови в нашей лаборатории не производится.

Наша лаборатория предлагает следующие виды услуг:

Ориентировочная стоимость, руб.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *